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液相色譜的分析結果數據如何來記錄和處理
點擊次數:1493 發布時間:2021-11-05
液相色譜儀主要的組成部件為壓泵、進樣裝置、色譜柱、檢測器和色譜數據處理裝置。
1.壓泵
由于液相色譜所使用的色譜柱一般裝填小于10μm的固定相顆粒,故對流動相有較大的阻力,所以對于泵的耐壓有一定的要求。除此之外,對于泵還有泵體材料耐化學腐蝕、輸出流量范圍寬、輸出流量穩定等要求。
壓泵可以分為恒壓泵和恒流泵兩大類。
恒壓泵是指輸出恒定壓力的泵,當系統阻力不變時可以保持恒定流量,但系統阻力發生變化時,就會影響到系統流量穩定,因此現在基本已不使用。恒流泵是指可輸出恒定體積流量的泵,又分為注射型泵和往復式柱塞泵兩類。注射型泵由于其工作過程中需停流吸液以及價格昂貴等原因,目前基本不用于液相色譜儀中。往復式柱塞泵則可以提供低脈動的連續穩定液流,應用于各種商品化儀器中,并衍生出了雙柱塞往復式并聯泵、雙柱塞往復式串聯泵、雙柱塞立驅動的往復式串聯泵等多種設計。
2.進樣裝置
在HPLC分析中由于使用了顆粒填料和壓的流動相,因而對樣品的進樣方式要求提,需要使樣品在進入色譜柱頭時地注人其上端填料的中心,形成集中的一點,以擴散效應影響降到。為實現以上要求有兩種設計:停流進樣和六通閥進樣,但現在停流進樣技術已經*被簡單易用的六通閥進樣方式所取代。
3.色譜柱
色譜柱一般使用內壁拋光的直型不銹鋼管作為柱管以獲得柱效。當使用粗內徑短柱和細內徑色潛柱時,需要注意柱外效應所引起的色譜峰展寬,應該盡量縮短進樣器至檢測器之間的連接管路,以獲得更小的柱外死體積。
HPLC色譜柱裝填的固定相,其基體材料多為多孔球形或無定形的硅膠顆粒,在壓下使用勻漿裝柱法裝填,并在色譜柱兩端使用多孔不銹鋼燒結材料的過濾片以阻擋流動相中的微小機械雜質進入,并防止固定相流失。
4.檢測器
檢測器主要用于檢測經色譜柱分離后的組分濃度變化。常用的檢測器為紫外/可見光檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器等。
5.色譜數據處理裝置
液相色譜的分析結果數據現已使用色譜數據工作站來記錄和處理。色譜工作站基于微型計算機的硬件,可以實現如下功能:
(1) 儀器操作參數的控制功能——色譜儀的可控參數,均可預設定并保存記錄,在運行樣品時自動調用并傳輸至儀器。
(2) 數據采集和處理功能——可通過計算機和儀器之間的數據傳輸接口自動采集色譜數據。并根據處理參數進行數據處理,提供色譜圖的相關積分數據,還可以選擇不同的標準計算方式來對樣品自動進行計算,得到定性或定量的結果。還具有計算柱效、繪制工作曲線等其他功能。
(3) 計量認證功能——通過工作站完成對儀器的自動認證程序,包括流量晶度、色譜柱控溫晶度、檢測器能量檢測等多項參數,并提供詳細的計量報告。 .
(4) 多臺儀器的自動控制——可以適時控制多套HPLC、系統,并同時立進行方法設定、樣品運行、數據采集處理。
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