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對色譜柱柱效值進行跟蹤測算應注意的問題
點擊次數:1374 發布時間:2020-05-26
對色譜柱柱效值進行跟蹤測算應注意的問題
我們也應記住柱效值并不足以預測在條件下的柱性能,對大多數色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有柱效并不能這種分離能力。
不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數影響柱效的測定。這些參數包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數所用的溶質,溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著大的作用。
幾種測量和計算柱效值的方法
因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態曲線來計算理論塔板數。因此計算柱效(以理論塔板數n為單位)的公式習慣上定義為:
式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰(從測峰寬的基線量起)有關的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。
假如一個色譜峰真是正態峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質,由于柱內的槽或空隙,也會出現非正態峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的處測量,計算的理論塔板數值就越大(性越低)。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個峰型(包括拖尾)的柱效值,同時為了定量的重復性,也需要色譜峰好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性***敏感的計算方法***適合。如果目的僅僅是要監測色譜柱從******次使用到使用壽命結束這一過程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應選擇***簡便的方法。
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