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液相色譜儀的衍生化技術(shù)介紹
點(diǎn)擊次數(shù):3555 發(fā)布時(shí)間:2017-11-17
液相色譜儀的衍生化技術(shù)衍是指將用通常檢測(cè)方法不能直接檢測(cè)或檢測(cè)靈敏度比較低的物質(zhì)與某種試劑(即衍生化試劑)反應(yīng),使之生成易于檢測(cè)的化合物的過(guò)程。按衍生化方法可分為柱前衍生化和柱后衍生化。
一、柱前衍生化: 柱前衍生化是指將被測(cè)物轉(zhuǎn)變成可檢測(cè)的衍生物后,再通過(guò)色譜柱分離。 這種衍生化可以是在線衍生化,即將被測(cè)物和衍生化試劑分別通過(guò)兩個(gè)泵送到混合器里混合并使之立即反應(yīng)完成,隨之進(jìn)入色譜柱;也可以將被測(cè)物和衍生化試劑反應(yīng),再將衍生物作為樣品進(jìn)樣;也可以在流動(dòng)相中加入衍生化試劑,進(jìn)樣后,讓被測(cè)物與流動(dòng)相直接發(fā)生衍生化反應(yīng)。
二、柱后衍生化: 柱后衍生化是指將被測(cè)物分離,再將從色譜柱流出的溶液與衍生化試劑在線混合,生成可檢測(cè)的衍生物,然后導(dǎo)入檢測(cè)器。按生成衍生物的類型可分為紫外可見(jiàn)光衍生化、熒光衍生化、拉曼衍生化和電化學(xué)衍生化等。
1、紫外可光見(jiàn)衍生化: (1)紫外衍生化是指將紫外吸收弱或無(wú)紫外吸收的有機(jī)化合物與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生化試劑反應(yīng),使之生成可以用紫外檢測(cè)的化合物。如胺類化合物容易與鹵代烴、羰基、?;愌苌噭┓磻?yīng)。 (2)可見(jiàn)光衍生化有兩個(gè)主要的應(yīng)用:一是用于過(guò)渡金屬離子的檢測(cè),將過(guò)渡金屬離子與顯色劑反應(yīng),生成有色的配合物、螯合物或離子締合物后用可見(jiàn)光檢測(cè);二是用于有機(jī)離子的檢測(cè),在流動(dòng)相中加入被測(cè)離子的反離子,使之形成有色的離子對(duì)化合物后,分離檢測(cè)。
2、熒光衍生化: 熒光衍生化是指將被測(cè)物與熒光衍生化試劑反應(yīng)后生成具有熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。 有的熒光衍生化試劑本身沒(méi)有熒光,而其衍生物卻有的熒光。 衍生化技術(shù)不僅使液相色譜儀分析體系復(fù)雜化,而且需要消耗時(shí)間,增加分析成本,有的衍生化反應(yīng)還需要控制嚴(yán)格的反應(yīng)條件。因此,只有在找不到方便而靈敏的檢測(cè)方法或?yàn)榱颂岱蛛x檢測(cè)的選擇性時(shí),才考慮用衍生化技術(shù)。
一、柱前衍生化: 柱前衍生化是指將被測(cè)物轉(zhuǎn)變成可檢測(cè)的衍生物后,再通過(guò)色譜柱分離。 這種衍生化可以是在線衍生化,即將被測(cè)物和衍生化試劑分別通過(guò)兩個(gè)泵送到混合器里混合并使之立即反應(yīng)完成,隨之進(jìn)入色譜柱;也可以將被測(cè)物和衍生化試劑反應(yīng),再將衍生物作為樣品進(jìn)樣;也可以在流動(dòng)相中加入衍生化試劑,進(jìn)樣后,讓被測(cè)物與流動(dòng)相直接發(fā)生衍生化反應(yīng)。
二、柱后衍生化: 柱后衍生化是指將被測(cè)物分離,再將從色譜柱流出的溶液與衍生化試劑在線混合,生成可檢測(cè)的衍生物,然后導(dǎo)入檢測(cè)器。按生成衍生物的類型可分為紫外可見(jiàn)光衍生化、熒光衍生化、拉曼衍生化和電化學(xué)衍生化等。
1、紫外可光見(jiàn)衍生化: (1)紫外衍生化是指將紫外吸收弱或無(wú)紫外吸收的有機(jī)化合物與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生化試劑反應(yīng),使之生成可以用紫外檢測(cè)的化合物。如胺類化合物容易與鹵代烴、羰基、?;愌苌噭┓磻?yīng)。 (2)可見(jiàn)光衍生化有兩個(gè)主要的應(yīng)用:一是用于過(guò)渡金屬離子的檢測(cè),將過(guò)渡金屬離子與顯色劑反應(yīng),生成有色的配合物、螯合物或離子締合物后用可見(jiàn)光檢測(cè);二是用于有機(jī)離子的檢測(cè),在流動(dòng)相中加入被測(cè)離子的反離子,使之形成有色的離子對(duì)化合物后,分離檢測(cè)。
2、熒光衍生化: 熒光衍生化是指將被測(cè)物與熒光衍生化試劑反應(yīng)后生成具有熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。 有的熒光衍生化試劑本身沒(méi)有熒光,而其衍生物卻有的熒光。 衍生化技術(shù)不僅使液相色譜儀分析體系復(fù)雜化,而且需要消耗時(shí)間,增加分析成本,有的衍生化反應(yīng)還需要控制嚴(yán)格的反應(yīng)條件。因此,只有在找不到方便而靈敏的檢測(cè)方法或?yàn)榱颂岱蛛x檢測(cè)的選擇性時(shí),才考慮用衍生化技術(shù)。